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【解決方案】馬兜鈴酸的檢測
發(fā)布日期:2024/6/18

 

 

馬兜鈴酸的檢測·  UPLC-MS/MS法   ·

馬兜鈴酸是一類硝基菲結(jié)構(gòu)化合物,主要存在于馬兜鈴科馬兜鈴屬和細(xì)辛屬植物中,含馬兜鈴酸的中藥材主要

包括金耳環(huán)、杜衡、朱砂蓮、天仙藤、木香馬兜鈴、尋骨風(fēng)、細(xì)辛等。馬兜鈴酸具有腎毒性、致突變及致癌作

用,被世界衛(wèi)生組織致癌物清單列為1類致癌物,長期或超量不規(guī)范服用含馬兜鈴酸的植物可引起腎臟損害、

致癌和致突變等副作用。


目前,有關(guān)馬兜鈴酸的檢測方法,主要是用甲醇水或甲醇提取,然后直接上機(jī)檢測,這就存在基質(zhì)效應(yīng)大、回

收率不穩(wěn)定等問題。為了解決這些問題,迪馬科技根據(jù)目標(biāo)化合物的性質(zhì),建立了馬兜鈴酸的檢測方法,樣品

先用水溶解,再用酸化乙腈提取,提取液再進(jìn)行兩次凈化,第一次先用C18凈化提取液,然后再用PWA-2小

柱進(jìn)行二次凈化,氮吹定容,上機(jī)。樣品經(jīng)過多次凈化,除去了樣品雜質(zhì),減小基質(zhì)效應(yīng),并且還保證了目標(biāo)

物的回收率,結(jié)果顯示,基質(zhì)效應(yīng)和回收率都在90-110%之間,完全滿足客戶需求。

 

 

1、適用范圍

本方案適用感特靈膠囊、丁細(xì)牙痛膠囊、胃炎寧顆粒、小青龍合劑中馬兜鈴酸的檢測。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 馬兜鈴酸儲(chǔ)備液(500μg/mL):準(zhǔn)確稱取適量馬兜鈴酸標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇溶解定容,配置成濃度為500μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液;

(2) 標(biāo)準(zhǔn)中間液Ⅰ:準(zhǔn)確吸取適量馬兜鈴酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用甲醇稀釋并定容,配置成濃度為1μg/mL的中間液Ⅰ;

(3) 標(biāo)準(zhǔn)中間液Ⅱ:準(zhǔn)確吸取適量馬兜鈴酸中間液Ⅰ,用甲醇稀釋并定容,配置成濃度為0.1μg/mL的中間液Ⅱ。

3、提取

稱取試樣0.5g于50mL離心管中,加入2mL水,渦旋混勻30s,再準(zhǔn)確加入25mL 5%乙酸乙腈溶液,渦旋10min,超聲提取10min,加入專用凈化包(Cat.#: 645xx),渦旋混合2min,4000r/min離心2min。取上清10mL,加入 C18,渦旋混合2min,4000r/min離心2min,上清液備用。

 

4、凈化

ProElut® PWA-2 250mg/6mL (Cat.#: 65823)

(1)活化:用5mL甲醇和5mL 2%甲酸水溶液活化小柱;

(2)上樣:將4mL備用液上柱,棄去流出液;

(3)淋洗:依次用5mL水、5mL 2%甲酸水溶液、5mL甲醇淋洗小柱,棄去流出液,推干;

(4)洗脫:用4mL 5%氨水甲醇洗脫小柱,接收流出液,推干,混勻,過PTFE針頭式過濾器(Cat.#: 37178),上機(jī)分析。

注:同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液

5、分析條件

(1) UPLC條件

色譜柱:Endeavorsil® C18,100x2.1mm, 1.8μm (Cat.#: 87003)

流速:0.3mL/min

進(jìn)樣量:5μL

柱溫:35℃

流動(dòng)相:A: 0.1%甲酸水溶液(含1mmol/L乙酸銨)  B: 乙腈

 

(2) 質(zhì)譜條件

電離模式:ESI

掃描方式:正離子掃描

檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓:5500V

霧化氣壓力:50psi

輔助氣壓力:50psi

氣簾氣壓力:20psi

離子源溫度:500℃

6、添加回收結(jié)果

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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